国家标准计划《水产品中核苷酸含量的测定 高效液相色谱法》由 TC156（全国水产标准化技术委员会）归口，TC156SC3（全国水产标准化技术委员会水产品加工分会）执行 ，主管部门为农业农村部。

主要起草单位 四川威尔检测技术股份有限公司 、浙江省海洋水产研究所 、上海海洋大学 、中国水产科学研究院黄海水产研究所 、湛江市食品药品检验所 。

（1）核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱基、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。

食源核苷酸对免疫系统、小肠的生长与发育、脂质的代谢和肝功能非常有益，在机体免疫系统调节过程中发挥着重要的作用，如影响淋巴细胞的成熟、活化和增殖，增强自然杀伤细胞活力、巨噬细胞的活化和吞噬功能，延迟超敏、移植排斥及肿瘤反应等，婴幼儿配方奶粉添加核苷酸可增强婴幼儿机体免疫力和抗感染能力；食源性核苷酸能够增强肠道的修复功能，添加了核苷酸的配方奶粉能够减少健康婴儿的腹泻发病率。

（2）水产品是人类食品中优质动物蛋白的主要来源之一，具有蛋白质含量高、脂肪含量低、味道鲜美等特点。

2021年我国水产品总产量达6693万吨，多年位居世界第一。

鲜味是水产品最重要的风味特征，核苷酸及其衍生物对鱼类鲜味的产生起着重要作用，水产品中的核苷酸包括胞嘧啶核苷酸（CMP）、尿嘧啶核苷酸（UMP）、鸟嘌呤核苷酸（GMP）、次黄嘌呤核苷酸（IMP）、腺嘌呤核苷酸（AMP）等，是水产品中常见的滋味物质，它们与游离氨基酸、无机离子等发生协同作用，赋予水产品特有的鲜味，并对其特征滋味具有重要贡献；风味是评价水产品品质的重要指标之一，呈味核苷酸作为水产品中重要的滋味物质，其含量测定对于水产品及其制品的品质分析至关重要；随着经济社会发展，水产品风味日益受到消费者重视，与经济效益的关系也越来越密切，因此水产品中呈味核苷酸的含量测定具有极高的经济意义和社会意义； （3）当前，国外有关核苷酸的测定标准方法有ISO 20638:2015《婴儿配方奶粉 核苷酸的测定 高效液相色谱法》、NF V03-188-2016《婴儿配方奶粉 采用液相色谱法测定核苷酸》、ISIRI 21445-2017《液相色谱法测定婴儿配方奶粉中的核苷酸》和TCVN 9515-2017《婴儿配方奶粉 液相色谱法测定核苷酸》，国内有GB 5413.40-2016《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》和SN/T 5438-2022 《出口乳粉中核苷酸含量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》，这些标准方法采用高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法，适用于婴幼儿奶粉和食品中游离核苷酸的测定。

婴幼儿食品和乳品多为配方食品，淀粉含量高，试样需经淀粉酶酶解后再提取核苷酸，而水产品中试样的核苷酸可用高氯酸直接提取，水产品的核苷酸含量较婴幼儿食品和乳品高非常多，上述婴幼儿食品和乳品中核苷酸标准方法样品前处理方法、标准曲线线性范围均不能满足水产品中核苷酸的测定要求，不适用水产品中核苷酸的测定。

（4）当前，国内外均没有水产品中核苷酸测定的方法标准，我国现行水产行业标准SC/T 3048《鱼类鲜度指标K值的测定》适用范围为鱼类可食部分中鲜度指标K值的测定，测定了腺苷三磷酸、腺苷二磷酸、腺嘌呤核苷酸、次黄嘌呤核苷酸、次黄嘌呤核苷、次黄嘌呤的含量，仅针对K值计算涉及的腺苷酸、肌苷酸的测定。

而水产品需要测定胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、次黄嘌呤核苷酸、腺嘌呤核苷酸等5种核苷酸含量，SC/T 3048不能满足水产品中核苷酸含量检测需求； （5）国内外文献有关水产品中核苷酸的测定方法主要为高效液相色谱法，该法样品前处理简单，核苷酸分离效果好、定性定量准确，稳定性和重复性好。

水产品中5种核苷酸的含量范围在0.1 mg/100g~300mg/100g之间，非常适合采用高效液相色谱法测定，方法检出限、定量限、线性范围等完全满足要求。

《水产品中核苷酸含量的测定 高效液相色谱法》是水产及水产加工品标准体系表（2022版）304.03.02水产品及其加工品方法标准中规划的重要检测方法标准。

制定水产品中核苷酸高效液相测定方法国家标准，可为有关高校、科研院所、检测机构和生产企业准确测定水产品呈味核苷酸、科学评估水产品滋味物质、开展水产品品质评价、名特优新农产品营养品质评价鉴定等提供检测标准方法依据，符合《“十四五”推动高质量发展的国家标准体系建设规划》、《农业绿色发展技术导则（2018-2030）》（农科教发[2018]3号）和《“十四五”全国农产品质量安全提升规划》等国家政策要求，有利于满足新时代老百姓对高品质水产品的消费需求，促进我国水产养殖业和水产品加工产业的高质量发展。

（1）范围 本文件描述了水产品中核苷酸含量的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于水产品中胞嘧啶核苷酸（CMP）、尿嘧啶核苷酸（UMP）、鸟嘌呤核苷酸（GMP）、次黄嘌呤核苷酸（IMP）、腺嘌呤核苷酸（AMP）含量的测定。 （2）主要技术内容 拟建立水产品中核苷酸的高效液相色谱测定方法 a. 样品前处理的选择和优化 针对水产品种类繁多复杂的特点，采用高速均质、振荡、超声等提取和净化手段，在确保测定结果准确的基础上，简化样品前处理过程，使之达到快速、简便、低成本、易推广的效果。 b. 色谱条件的选择和优化 选择、优化液相色谱条件，获得最佳的灵敏度和准确度，并通过对色谱柱、洗脱方式和程序、流动相等色谱条件的摸索获得分离度高、耗时短的液相分析方法。 c. 方法学研究、适用性考察和标准验证 在研究内容a和研究内容b的基础上，将样品前处理技术和色谱条件结合，开展方法学研究和适用性考察，开展方法线性范围、检测限、定量限、回收率和精密度试验等研究，对线性范围、灵敏度、准确度和精密度等参数进行评价，建立水产品中核苷酸的高效液相色谱测定方法，方法回收率在90%~110%之间，标准曲线线性回归方程相关系数不低于0.99，精密度试验实验室内变异系数低于8.0%。开展方法适用性考察，完成5家省部级质检机构或知名第三方检测机构本标准验证工作。