国家标准计划《食用菌中凝集素的测定 高效液相色谱法》由 424-cnis（中国标准化研究院）归口 ，主管部门为市场监管总局。

主要起草单位 中国科学院过程工程研究所等 。

食用菌产品主要以鲜销、干制、盐渍、速冻等方式为主，在其加工生产过程中会产生大量的废弃物，主要有菌脚、菇片、菌柄基部等。

这些废弃物难以食用或商品价值低，开发利用率极低，多限于在动物饲料和有机肥中使用，因此对食用菌加工废弃物中的主要活性成分进行深入研究，可以实现其高值化综合利用。

在食用菌加工废弃物中含有大量的蛋白质，是优良的活性成分资源。

据报道，食用菌中的蛋白质具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、降血压等生物活性，其中凝集素是食用菌中一类糖蛋白，它能与糖专一地、非共价地可逆结合，具有免疫调节、抗增生、抗肿瘤和抗病毒等功能，是目前国际上的研究热点。

据报道，从草菇、裂褶菌、牛肝菌等菌类中能提取出具有免疫调节功能的凝集素，能有效促进小鼠淋巴细胞有丝分裂；从蒙古口蘑、草菇、糙皮侧耳等中能提取具有抗肿瘤功能的凝集素，能有效抑制小鼠肉瘤细胞；从杨树菇、毛头鬼伞等中能提取具有抗病毒活性的凝集素，对烟草花叶病毒有明显的抑制作用。

利用凝集素与糖类的特异性结合，或对不同糖结合力的差异、以及凝集素自身特性，凝集素已作为生物材料的重要组成部分，被用于药物输送、生物检测、组织修复等方面，并表现出一些非常有趣和新颖的功能，如用于对黏膜上皮细胞、癌细胞、血脑屏障的靶向给药。

在我国，关于食用菌凝集素的研究刚刚起步，通过对食用菌加工废弃物中的凝集素提取加工工艺、检测与功效评价方法的深入研究，有助于提高我国食用菌凝集素研究水平，促进食用菌加工产业健康发展。

凝集素的检测方法在国内外还没有统一标准，因此急需建立一套科学合理的凝集素检测体系。

目前国内外用于检测凝集素的方法主要有血凝法、放射性同位素标记糖复合物法、免疫学方法等。

血凝法是利用凝集素能够凝聚天然或酶处理的人或动物红细胞的特性，对凝集素进行检测，受多种条件的影响，主要包括粉碎粒度、脱脂方法和抽提方法等。

另外，在测定时需对测定条件的进行反复的筛选，过程十分复杂。

放射性同位素标记糖复合物法是用放射性同位素标记糖复合物后，与凝集素保温，由于凝集素的多价结合位点，使糖复合物与凝集素结合而易在高盐浓度下发生沉淀，进而借助离心或过滤的方法将结合和游离的标记化合物分开。

通过测定沉淀中放射性的强度，可计算出凝集素的结合标记化合物的量和结合常数，也可通过抑制剂或竞争性底物对沉淀中放射性强度的影响程度，计算出抑制剂或竞争性底物的抑制常数或结合常数，比较这些抑制剂的抑制常数就可确定凝集素的专一性或结合活性，得出凝集素的含量。

该方法操作复杂，且需要特殊的设备和防护措施，在实际操作中受到限制。

通过免疫学方法用抗凝集素特异性抗体进行火箭免疫电泳、酶联免疫吸附法或放射免疫分析法进行定量分析，该方法因需数月的抗体制备过程而费时过长，也不易于推广。

高效液相色谱（HPLC)是目前能够快速纯化凝集素的重要技术手段，可以结合离子交换层析、分子排阻层析以及亲和层析等技术，从而获得高纯度的凝集素，提高了纯化的效率。

亲和层析是纯化凝集素最有效的办法，亲和层析的应用主要基于凝集素可以特定及可逆地结合糖的能力。

用于纯化凝集素的亲和层析介质的不同配体是根据凝集素对糖的特异性来选择的，可通过单糖或寡糖进行凝集素活性抑制分析来确定。

凝集素与亲和层析介质配体吸附后，通过改变与凝集素竟争结合糖的浓度，或改变pH及离子强度来完成解吸附。

通过将亲和层析和高效液相色谱相结合，能有效且快速地对凝集素进行分析检测，建立一种对食用菌、食用菌加工废弃物中的凝集素的检测方法，有助于对食用菌加工废弃物中凝集素的深入研究，为其高值化综合利用打下基础，为食用菌新兴产业发展提供技术支撑，延长食用菌产业链条，提高食用菌产业综合生产能力。

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本标准规定了用高效液相色谱对菌菇中凝集素的检测方法。 适用于食用菌、食用菌加工废弃物中的凝集素含量检测。

2017YFF0207800 主要农业废弃物提取加工与功效评价标准研究