国家标准计划《生化制品中还原糖的测定 柱前衍生高效液相色谱法》由 TC387（全国生化检测标准化技术委员会）归口 ，主管部门为国家标准委。

主要起草单位 中国测试技术研究院 、中国测试技术研究院生物研究所 、青岛科技大学 。

生物制品是指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织作为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活性制剂，包括菌苗、疫苗、毒素、类毒素、免疫血清、血液制品、免疫球蛋白、抗原、变态反应原、细胞因子、激素、酶、发酵产品、单克隆抗体、DNA重组产品、体外免疫诊断制品等。

糖是自然界存在最多、具有广谱化学结构和生物功能的有机化合物。

可用通式Cx(H2O)y来表示。

有单糖、寡糖、淀粉、半纤维素、纤维素、复合多糖，以及糖的衍生物。

主要由绿色植物经光合作用而形成，是光合作用的初期产物。

从化学结构特征来说，它是含有多羟基的醛类或酮类的化合物或经水解转化成为多羟基醛类或酮类的化合物。

它与蛋白质、脂肪同为生物界三大基础物质，为生物的生长、运动、繁殖提供主要能源，是人类生存发展必不可少的重要物质之一。

糖类化合物是一切生物体维持生命活动所需能量的主要来源。

糖不仅是营养物质，而且有些还具有特殊的生理活性。

糖类物质（还原糖）大量存在于各种生化制品中，其含量的高低是影响生化制品功效的重要因素；其中的还原糖种类较多，生化试剂中常见的还原糖为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖等。

目前还没有国家标准是针对生化制品中还原糖的测定的方法。

为此，以操作简单、灵敏度高、准确性好、线性范围宽、所用试剂毒性小等为原则，建立适合生化试剂中不同含量的还原糖的测定方法迫在眉睫，皆在为更为准确的评价生化试剂等级和功效进行评价，为生化制品的发展解决基础技术问题。

标准规定了用液相色谱-紫外法法测定生化样品中甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的含量测定。 本标准主要技术内容： 方法原理：生化制品中还原糖经水提取，与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮在碱性条件下反应，生成糖衍生物，经液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。 (1) 仪器条件: 色谱柱：Agilent XDB-C18，1.8 μm，3.0*100mm (2) 流动相：A相为含20 mM甲酸铵水溶液；B相为乙腈 (3) 流速：0.4 mL/min (4) 柱温：20℃ (5) 检测器波长：245nm (6) 进样量：10 μL； 标准曲线的制作： 分别称取各还原糖标准样品0.025g于25mL容量瓶中，纯水定容，混合标准溶液母液浓度为1000μg/mL。分别取0.05mL 、0.10mL 、0.25mL、0.5mL、1mL、2mL混合标准溶液母液定容至10mL容量瓶，配制成5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL标准溶液浓度系列。 试样的测定： 分别吸取待测试样和不同浓度的标准溶液各200μL置于15mL具塞试管中，加入1mol/L NaOH溶液100μL，0.5mol/L PMP衍生化试剂500μL，于70℃恒温水浴90min，冷却至室温，加入1mol/L HCl溶液100μL，减压蒸馏后加入2mL水溶解定容，再加入2mL三氯甲烷萃取，充分震荡、离心，弃去下层有机相，重复此操作2次，取上层水相1mL经0.45μm滤膜过滤用于HPLC分析。以峰面积为纵坐标，混合标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。

2015年度国家科技支撑计划《科研用试剂产业链创新体系的构建》（编号2015BAK45B00）任务内容。