国家标准计划《保健食品中水飞蓟宾的测定》由 TC466（全国特殊食品标准化技术委员会）归口，TC466SC1（保健食品分析方法）执行 ，主管部门为市场监管总局（特殊食品）。

主要起草单位 南京市食品药品监督检验院 、国家市场监督管理总局食品审评中心 、中国质量检验检测科学研究院食品安全研究所 、中轻技术创新中心有限公司 、中国标准化研究院 、中国食品发酵工业研究院 、河北省食品检验研究院 。

水飞蓟素是由菊科植物水飞蓟果实中提取得到的黄酮类化合物，包括水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭和水飞蓟醇，其中水飞蓟宾为主要有效成分。

水飞蓟宾分子式C25H22O10，具有抗氧化、降血脂、清热解毒和疏肝利胆等化学活性，达到改善肝功能、增强肝细胞膜、保护肝脏等活性作用，因而被用于保健食品中。

目前市场上含水飞蓟提取物的相关保健食品的剂型主要有颗粒剂、片剂、硬胶囊、软胶囊等，通过国家市场监督管理总局特殊食品信息查询平台查询，一般与灵芝、葛根、五味子、红景天、黄芪、丹参、姜黄素、蒲公英、维生素E等一种或多种复方使用。

依据《中华人民共和国食品安全法》《保健食品注册与备案管理办法》和GB 16740-2014 《食品安全国家标准 保健食品》等的要求，保健食品属于特殊食品，需符合安全性和功能性要求，保健食品的配方、工艺及质量标准需经审批或备案，成分检测方法需科学、规范。

但是目前保健食品中水飞蓟宾的测定尚无国家标准测定方法和规范。

《中华人民共和国药典》中规定了采用高效液相色谱法测定水飞蓟宾的含量，由于保健食品种类繁多、成分复杂、干扰因素多等特点，在前处理方面与药物制剂和中药材有很大不同。

SN/T 4002-2014 《出口保健食品中水飞蓟宾的测定 高效液相色谱法》中规定了胶囊和片剂类保健食品中水飞蓟宾的测定，适用基质类型覆盖不全面。

因此，亟需建立一种重复性好、专属性强、操作简便、适用基质覆盖全面的测定保健食品中水飞蓟宾含量的方法，为保健食品中水飞蓟宾含量的测定提供参考。

本项目拟针对相关产品剂型有针对性的开发适用性强的前处理方法，采用高效液相色谱法分析建立检测保健食品中水飞蓟宾的方法。

相关标准实施后，将在经济、社会和生态三个方面产生显著效益：（1）经济效益：可促进产业规范化发展。

标准实施后，企业生产、检测有据可依，减少因检测方法不统一导致的质量纠纷，降低合规成本。

可降低企业风险与成本，检测方法标准化可减少重复研发投入，中小企业可共享第三方检测资源，降低检测成本。

可推动高附加值产品开发，精准测定水飞蓟宾含量有助于企业优化配方，进一步开发高端产品。

（2）社会效益：一方面可保障消费者权益与健康，通过严格检测确保产品功效真实性，减少虚假宣传，降低食品安全风险。

另一方面可提升监管效率与公信力，为市场监管部门提供执法依据，打击假冒伪劣产品，增强公众对国产保健食品的信心。

（3）生态效益：促进资源高效利用，精准测定可优化水飞蓟原料的提取工艺，减少原料浪费，减少无效生产过程中的能源消耗与废弃物排放。

水飞蓟提取物以保肝功效闻名，广泛应用于保健食品、药品和功能性食品领域。

水飞蓟保健食品在欧美、亚洲等地区需求稳定增长，主要驱动因素包括肝健康问题高发、消费者对天然成分的偏好，以及保健食品行业的整体扩张。

我国是水飞蓟的主要生产国和消费国之一，随着健康意识提升和肝病防控需求增加，水飞蓟类保健食品销量逐年上升，电商平台和国际品牌的推广也进一步推动了市场普及。

水飞蓟功效成分的测定方法主要有薄层扫描法、胶束电动毛细管色谱法、紫外可见分光光度法和高效液相色谱法。

其中薄层扫描法操作方便、设备简单、显色容易,但分离效果差、重现性低。

胶束电动毛细管色谱法灵敏度高，但操作复杂，重现性差。

紫外可见分光光度法操作简便但特异性交叉，精确度较低。

高效液相色谱法具有操作简单、仪器成本较低且稳定性好等特点，常用于水飞蓟素的测定。

目前高效液相色谱法方法相对成熟，有较多可借鉴的研究基础，但缺乏统一的行业或国家标准，各实验室方法差异较大，标准制定过程中样品前处理、色谱条件优化、标准品可获得性等是主要的技术难点。

保健食品中水飞蓟宾的测定标准的制定在技术上已具备较好基础，HPLC方法成熟度最高且经济性较好，适合作为国家标准的主要方法。

标准制定过程中需充分考虑不同规模企业和检测机构的承受能力，建立科学合理、经济可行的技术规范体系。

拟制定标准暂时未有相关国家标准测定方法和规范。主要技术要求如下： 1、范围 本文件描述了保健食品中水飞蓟宾的液相色谱测定方法。 本文件适用于以水飞蓟作为原料的保健食品中水飞蓟宾的测定。 2、规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3、术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4、原理 样品中的水飞蓟宾采用甲醇进行超声提取，使用高效液相色谱二极管阵列（或紫外）检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。 5、试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂：甲醇（CH3OH）：色谱纯。 5.2标准品：水飞蓟宾标准品（C25H22O10，CAS号：22888-70-6）：纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 5.3标准溶液配制： 水飞蓟宾标准储备溶液（1.0 mg/mL）：准确称取0.01 g水飞蓟宾标准品（精确至0.0001 g），用甲醇（5.1.1）溶解并定容至10 mL，混匀，2℃~8℃条件下避光保存，有效期1个月。 水飞蓟宾标准使用液（100 μg/mL）：准确吸取1.00 mL水飞蓟宾标准储备溶液于10 mL容量瓶中，用甲醇（5.1.1）定容，混匀，2℃~8℃条件下避光保存，临用现配。 5.4标准系列工作液配制： 吸取标准使用液（5.3.2），用甲醇（5.1.1）稀释并定容，浓度分别为1 μg/mL、5 μg/ mL、10 μg/ mL、50 μg/mL、100 μg/ mL、200 μg/ mL。临用现配。 5.5材料：微孔滤膜：0.45 μm，有机系。 6、仪器和设备 高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器或紫外检测器。 电子天平：精度0.001 g和0.1 mg。 超声波清洗器。 粉碎机。 离心机，转速不低于8000 r/ min。 7、分析步骤： 7.1试样制备 固态或半固态试样（软胶囊、硬胶囊等）：取不少于20粒或不低于5 g样品剪开，取出内容物研细（必要时），混匀，封存备用； 固态或半固态试样（片剂、粉剂、颗粒剂、糖果类、丸剂等）：取不少于20片（粒）样品，研细（必要时），混匀，封存备用； 液体试样（口服液、酒剂、饮料等）：取5～10支独立包装或不低于20 mL 样品混合均匀，封存备用。 7.2试样处理 称取0.2 g（mL）试样（精确至0.001 g）置于25 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇（5.1.1）超声提取20 min后，冷却至室温后，用甲醇定容至刻度，摇匀，静置取上清，过滤膜后上机。 7.3色谱参考条件 a)色谱柱：C18色谱柱（250×4.6 mm，5 μm），或等效色谱柱； b)流动相A：甲醇（5.1.1）；流动相B：水；梯度洗脱。 c)柱温：30？C； d)进样体积：10 μL； e)检测波长：287 nm。 7.4标准曲线的制作 将标准系列工作液（5.4）分别注入高效液相色谱仪中，测定峰面积，以相应标准工作液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准溶液的色谱图参见附录A中图A.1。 7.5试样溶液的测定 将试样溶液过微孔滤膜后，注入高效液相色谱仪中，得到相应峰面积，根据标准曲线，以外标法计算待测试样溶液中水飞蓟宾的含量。 注：操作者可根据试样中组分的含量，适当增加稀释倍数f，以不超出标准曲线测定范围。 8、精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 9、检出限和定量限 当取样量为0.2 g（mL），定容体积为25 mL时，本方法的检出限(LOD)为0.3 g/100g，定量限(LOQ)为1.0 g/100g。