国家标准计划《动物华支睾吸虫病诊断技术》由 TC181（全国动物卫生标准化技术委员会）归口 ，主管部门为农业农村部。

主要起草单位 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心 、澳东生物（深圳）有限公司 、云南省寄生虫病防治所 、广东省疾病预防控制中心 、广东省农科院动物卫生研究所 、深圳市疾病预防控制中心 。

华支睾吸虫病（Clonorchiasis）是一种重要的人兽共患寄生虫病，广泛流行于中国、韩国、越南等亚洲地区及俄罗斯的远东地区，给流行国家尤其是我国造成较大的经济损失。

我国新修订的《一、二、三类动物疫病病种名录》将其列为三类动物疫病，目前我国缺少陆生动物感染华支睾吸虫的检测和诊断标准，无法满足当前动物华支睾吸虫病诊断、检验检疫、抗体监测等多种需求。

因此，建立动物华支睾吸虫病诊断的国家标准，对于临床兽医、检验检疫等科研工作者及时、准确做好诊断，从而对疫病的防控与监测采取快速、合理有效的应对措施，意义重大。

综上所述，拟立项的国家标准《动物华支睾吸虫病诊断技术》更加全面、科学、客观和权威，并具有先进性，能够为动物华支睾吸虫病的科研和检测提供系统性的诊断标准，对我国寄生虫病的诊断与预防具有重要的意义。

本文件适用于动物华支睾吸虫病的诊断。临床诊断适用于疑似动物华支睾吸虫病的初步诊断，形态学检查、聚合酶链式反应和实时荧光聚合酶链式反应适用于华支睾吸虫成虫、虫卵、囊蚴阶段的鉴定。酶联免疫吸附试验适用于华支睾吸虫抗体的检测。 本文件主要技术内容如下： 1.临床诊断：根据动物华支睾吸虫病的流行特点、临床症状和病理变化，可以作出初步诊断，再通过实验室诊断对该病达到确诊的目的。 2.样品采集、运输及处理：主要规定了动物粪便样本沉淀集卵法的采集和处理；动物组织样品自然沉淀法的采集和处理；犬猫等陆生动物肝脏胆管的采集与处理。 3.形态学检查：利用盐酸乙醚沉淀法、改良加藤厚涂片法对动物的粪便样本或者组织样本进行收集纯化，再通过对其镜检分析样本的生物形态，若符合华支睾吸虫形态特征的判为疑似动物华支睾吸虫病病例。 4.聚合酶链式反应（PCR）：在PCR实验中，在反应管中加入反应物，在PCR仪中按照PCR反应体系进行PCR扩增，根据琼脂糖凝胶电泳来判断试验结果。也可取PCR扩增产物进行序列测定，序列结果以公开发表的华支睾吸虫特异性核酸片段序列进行比对，判定待测样品华支睾吸虫核酸检测结果阴阳性。 5.实时荧光聚合酶链式反应（荧光PCR）：根据华支睾吸虫COX1基因序列设计华支睾吸虫实时荧光PCR的特异性引物和探针。在荧光PCR实验中，根据样本的荧光PCR扩增结果的Ct值判定样本的阴阳性。 6.酶联免疫吸附试验（ELISA）：此方法通过酶标记抗体与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。在添加底物溶液后，底物可在酶作用下出现颜色反应。通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应。也可在酶标专用比色计上读取光密度(OD)值，判断检测样本的阴阳性。