国家标准计划《牛性控冷冻精液》由 TC274(全国畜牧业标准化技术委员会)归口 ,主管部门为农业农村部。
主要起草单位 北京奶牛中心 、全国畜牧总站 、中国农业大学 。
| 65 农业 |
| 65.020 农业和林业 |
| 65.020.30 动物饲养和繁殖 |
1、必要性 总书记指出:“种源安全关系到国家安全,必须下决心把我国种业搞上去,实现种业科技自立自强、种源自主可控”。
国家把种源安全提升到关系国家安全的战略高度。
中央和各部委制定了一揽子规划和方案,集中力量破难题、补短板、强优势、控风险,推进国家种业振兴行动战略,的实施。
“牛业发展,种业先行”。
当前,我国奶牛、肉牛种源自给率分别为 30%、70%,生产性能奶牛平均为发达国家的 80%,肉牛为发达国家的 50%。
因此,我国奶牛、肉牛良种资源严重不足已成为限制产业高质量发展的关键因素。
性别控制技术是当今全球最先进的动物生物工程技术之一,被誉为家畜良种扩繁的第三次技术革命。
牛性控冷冻精液的使用可极大的提高良种扩繁速度,助力畜牧业高质量发展,推动牛品种改良工作“提档增速”,优化良种畜结构和生产性能,促进农牧民增产增收。
《牛性控冷冻精液》(GB/T 31582)标准于2015年首次发布,迄今已有8年。
标准的贯彻实施,对于我国性控冷冻精液的推广普及发挥了重要作用,对于我国遗传改良及快速扩繁提高起到了积极作用。
目前使用性别控制冻精受精技术能使母犊的出生比例达到 85%~95%,这样就大大提高了奶牛的扩繁效率对于有效提高牧场的经济效益具有十分重要的意义。
性控冷冻精液质量,特别是精液活力及分离准确率直接影响性控冷冻精液受胎率,影响牧场经济效益。
目前性控精液标准的使用有一定的局限性:1)由于活力低、前向运动精子数少,性控冷冻精液仅用于青年牛人工授精,且受胎率仅达到常规冷冻精液的80%,目前进入我国自产性控冷冻精液及进口性控冷冻精液已经大量应用于成母牛的超级性控冷冻精液,其精子数是常规性控冷冻精液的1倍,活力≥40%,受胎率提高8.5%,极大的解决了性控精液仅用于青年牛的瓶颈,但超级性控精液质量残次不齐,没有用于市场监管的性控冷冻精液标准。
2)目前市场上大量出现分离准确率<85%的个性化性控冷冻精液,母犊率达82.3%,但该类性控精液质量残次不齐,没有用于市场监管的性控冷冻精液标准;3)目前性控冷冻精液活力检测依然依赖目测法,精液活力、前进运动精子数检测受人员的主观判定影响较大、效率较低。
国内种猪常温精液(GB 23238-2021)、马驴冷冻精液(NY/T 3796-2020)采用计算机辅助分析仪对精液进行活力、前向运动精子数检测,避免了由于目测对精液判断的不准确、效率低等一系列问题。
基于以上原因,我国的牛性控冷冻精液标准不能完全适用于牛性控冷冻精液的要求,亟待进行修订。
2、可行性: 性控冷冻精液成为奶牛、肉牛行业的良种扩繁的第三次革命,目前,我国奶牛、肉牛市场使用性控精液250万剂/年,年改良母牛120万头,性控冷冻精液使用较常规冷冻精液,年多出生约25万头种牛。
性控精液质量的提升及检测方案的修订对加快我国奶牛、肉牛遗传改良进程,助力我国种业振兴起到关键作用。
3、有关技术的成熟度 课题组自2008年开始开展牛性控冷冻精液生产及研究,经过15年的积累,开展了308070头次的牛性控冷冻精液受胎试验形成如下技术:1)将性控冷冻精液每剂量中前向运动精子数由80万个提高到150万个,受胎率提高9.3%;2)北京奶牛中心联合农业农村部牛冷冻精液质量检验测试中心(北京)采用计算机辅助分析仪对性控冷冻精液活力检测进行试验研究。
对715次目测检测活力与仪器法检测结果进行比对,相对偏差为3.8%;两者之间的相对偏差小于 5%,则可以用仪器法对性控冷冻精液活力进行检测;3)北京奶牛中心联合农业农村部牛冷冻精液质量检验测试中心(北京)采用计算机辅助分析仪对性控冷冻精液前进运动精子数检测进行试验研究。
对885次目测检测活力与仪器法检测结果进行比对,相对偏差为3.2%,两者之间的相对偏差小于 5%,则可以用仪器法对性控冷冻精液前向运动精子数进行检测。
4)课题组利用分离准确率为75%以上性控冷冻精液对35970头牛群进行人工授精,母犊率平均为83.5%,能够满足市场的需要,且性控冷冻精液的价格降低了20%。
综合上述数据,课题组已经具备修订该标准成熟的技术方案。
鉴于此,有必要尽快修订《牛性控冷冻精液》,标准的修订将有助于我国自主培育种公牛性控冷冻精液的实施,提高性控冷冻精液质量,提高性控冷冻精液人工授精受胎率、优秀遗传物质能够高效用于我国牛群遗传改良,加快我国自主培育种公牛市场占有率,助力我国种业振兴。
1.范围 本文件规定了牛性控冷冻精液的技术要求、取样、检验规则、标志和随行文件、包装、贮存和运输,描述了牛性控冷冻精液质量检验的试验方法。 本标准适用于采用流式细胞分离技术生产牛性控冷冻精液。 2.主要修订技术内容: (1)增加了增加里“前向运动精子数”“菌落总数”的定义 ——修订标准: 前向运动精子数 number of progressively motile sperm 每剂量精液中呈前向运动精子的总数。 [来源:GB 23238-2021,3.5] 菌落总数 aerobic plate count 每剂量精子在一定条件下培养后观察到的微生物菌落总数。 [来源:GB 4143-2022,3.3] (2)删除了“种公牛”和“新鲜精液”的要求; (3)将“冻精外观”的技术要求调整为“包装”要求; ——原标准: 外观:细管无裂痕,两端封口严密。 ——修订标准 9 包装、贮存和运输 9.1 内包装:细管封口严密、标志清晰。 9.2 外包装:产品外包装应符合GB/T 30396-2013 中第4章要求。 9.3 贮存和运输:贮存和运输应符合 GB/T 30396-2013 中第7章、第8章要求。 (4)更改了“剂量”、“精子活力””、“前向运动精子数”、“菌落总数”和“分离准确率”的技术要求; ——原标准 剂型、剂量:细管冷冻精液:微型、剂量:0.18mL;精子活力:≥35%;前进运动精子数≥80万个;分离准确率≥85%;精子畸形率≤15%;细菌菌落数≤800个。 ——修订标准 牛性控冷冻精液应符合表 1 中的规定。 表 1 技术指标 项 目 单位 低分离准确率性控冷冻精液指标 常规性控冷冻精液指标 超级性控冷冻精液指标 剂量 mL 微型≥0.19 微型≥0.19 微型≥0.19 中型≥0.42 中型≥0.42 中型≥0.42 精子活力 % 普通牛、瘤牛≥38 普通牛、瘤牛≥38 普通牛、瘤牛≥38 水牛、牦牛及大额牛≥35 水牛、牦牛及大额牛≥35 水牛、牦牛及大额牛≥35 前向运动精子数 104个/剂 ≥80 ≥80 普通牛、瘤牛≥150 精子畸形率 % ≤15 ≤15 ≤15 菌落总数 CFU/剂 ≤500 ≤500 ≤500 分离准确率 % ≥75 ≥85 ≥85 注 :普通牛涵盖各品种奶牛、肉牛、兼用牛和黄牛。 (5)增加了“精子活力”“计算机辅助分析仪法”和“前向运动精子数”的“计算机辅助分析仪法”检测方法 ——修订标准 精子活力及前向运动精子数计算机辅助分析仪法检测:利用计算机辅助分析软件的主要技术参数应为 VCL 不小于 5 μm/s、VSL 不小于 5 μm/s、 STR=VSL/VAP 不小于 25%。精子质量分析仪可读取并显示多个视野的平均值。 (6)增加了“精子质量分析仪检测精子密度的校正方法”的内容(见附录 B)。 ——修订标准 将血球计数法和仪器法的最终检测结果进行比对,若两者之间的相对偏差小于 5%,则精子质量分析仪完成校正。否则应按照精子质量分析仪的参数设置程序,调整精子密度检测的相关参数,并重复 B.3 的步骤,直至血球计数法和仪器法检测结果之间的相对偏差小于 5%。