国家标准计划《饲料中维生素D3的测定 高效液相色谱法》由 TC76（全国饲料工业标准化技术委员会）归口 ，主管部门为国家标准委。

主要起草单位 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心（北京） 、山东省饲料质量检验所 、帝斯曼维生素（上海）有限公司 、四川威尔检测技术股份有限公司 。

一、项目的必要性 1. 维生素D3是维持机体正常活动必不可少的物质，是允许使用的维生素之一，但过量使用对动物亦有毒害作用，因此国家对其制定了在饲料中的最高限量。

为了有效控制产品质量、加强监管，饲料中维生素D3的准确定量非常重要，因此建立并适时修订“饲料中维生素D3的测定”标准是非常有必要的。

2. 目前国内现行有效的饲料中维生素D3的测定标准为GB/T 17817-2010《饲料中维生素D3的测定 高效液相色谱法》，已经有10年的标龄。

在企业和质检机构日常检测中，在农业农村部及地方监督抽查、风险评估和预警监测中，都发挥了巨大的作用。

但是，随着饲料行业的蓬勃发展，一是维生素D3原料生产工艺在不断改进，为了避免动物同源性原料污染，维生素D3包被除了传统的明胶包被材料，还采用双重乳化工艺用淀粉包埋，新出现的包被型产品，由于对活性成分具有较好的保护作用，市场认可度高，但是，使用目前版本标准检测其成分含量时存在检测结果准确性差，检测结果明显偏低；二是各类饲料产品生产配方、生产工艺也在随着饲料原料的市场供应不断发生变化，饲料生产技术也在不断提高，如在生产添加剂预混合饲料时添加油脂粉等能量原料。

所以在检测维生素D3时，面临的产品日趋复杂多样，对检测技术要求越来越高。

这就需要对已有10年标龄的维生素D3测定标准尽快修订，改进样品前处理方法、利用更加先进的检测手段，简化步骤、提高效率，准确检测。

3. 修订的主要内容：一是标准的适用范围增加精料补充料、饲料添加剂两类市场上常见产品，使得该标准应用范围更加广泛，解决市场急需。

二是在第一法（皂化提取法）中，增加二维色谱净化方法。

三是根据以往工作经验及文献查询，样品的制备及保存对维生素D3含量影响非常大，需要补充完善。

四是当前有些添加剂预混合饲料中添加油脂粉，脂肪含量较高，对于这类产品，原标准检测结果会偏低许多。

修订时增加除脂步骤，确保结果准确。

五是根据维生素D3原料的特点，修改第二法（直接提取方法），增加酶解处理，修改提取温度，确保提取彻底，检测准确。

六是进一步优化色谱条件和前处理条件，增加检测限，优化定量限。

七是按照GB/T 1.1-2020要求，对全文进行规范编写。

二、项目的可行性 1. 起草单位有制修订标准工作基础 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心（北京）]从上世纪80年代就率先开始了饲料标准的制定工作，起草了饲料行业的基础标准如GB/T 14699.1、GB/T 20195，以及检测方法标准如GB/T 6432、GB/T 6435、GB/T 6439、GB/T 6437等，近年来更是起草了大量饲料添加剂强制性国家标准和饲料中禁用物质标准。

先后承担制修订并已经发布实施了100多项国家标准和行业标准，为行业保驾护航多年，范围囊括了饲料、饲料添加剂、饲料原料，以及畜禽粪便和动物尿液等。

山东省饲料质量检验所、四川威尔检测技术股份有限公司和帝斯曼维生素（上海）有限公司也先后承担制修订并已经发布实施了如《饲料中钙、铜、铁、镁、锰、钾、钠和锌的测定－原子吸收光谱法》等70多项项国家标准、行业标准和地方标准。

均为饲料和畜产品质量安全监管做出了巨大贡献。

2.起草单位在维生素D3的测定方面积累了丰富的经验 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心（北京）]、山东省饲料质量检验所和四川威尔检测技术股份有限公司等起草单位多年来承担承担全国、农业部及华东区和山东省的饲料质量安全监督抽查、预警和风险评估任务，进口饲料和饲料添加剂的检测任务，以及全国饲料和饲料添加剂的冲仲裁裁和异议复合等重要检测任务。

帝斯曼维生素（上海）有限公司作为全球较大的维生素生产企业，在维生素生产和质量控制方面有非常丰富的经验，在维生素检测方法的研制上起到了引领的作用。

特别是饲料中维生素D3的检测，几家起草单位每年检测上万批次，积累了大量经验，对维生素D3原料生产技术深有研究，且一直坚持与相关饲料质检科研单位、生产使用企业、国内外分析仪器公司合作研发检测技术，吸收先进的检测理念，利用先进的检测手段改进检测方法，持续不断对饲料中维生素D3的检测技术进行研究，为标准修订积累了一定的工作基础。

3. 项目主持人及主要起草人多数曾参与和主持了本标准的1999年版和2010年版的起草工作，数十年来从事饲料中维生素检测工作。

一、范围 本标准第一法适用于配合饲料（包括宠物饲料）、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料和饲料添加剂中维生素D3的测定。本标准第二法适用于维生素预混合饲料和饲料添加剂中维生素D3的测定。 二、主要技术内容 1.对比样品制备方法，比较现用现制备与制备后放置不同时间的检测结果差异，确定制备和保存条件。 2.添加油脂粉的添加剂预混合饲料其脂肪去除方法的比较优化。 3. 第一法前处理：样品皂化后，HPLC测定（包括正向色谱、反相色谱和二维色谱）。优化色谱条件。 4. 第二法前处理：样品经过酶解处理，释放维生素D3，甲醇提取， HPLC测定。优化色谱条件。 5. 确定方法的检出限，优化方法的定量限。 6. 测定不同样品，确定方法的重复性、再现性，以及方法的准确性。 7. 测试其他成分的干扰情况。