注册

国家标准计划《肌动蛋白抗体的检测 免疫印迹法》由 TC387(全国生化检测标准化技术委员会)归口上报及执行 ,主管部门为国家标准化管理委员会

主要起草单位 中国测试技术研究院正能生物中国测试技术研究院生物研究所青岛科技大学

目录

基础信息

计划号
20184460-T-469
制修订
制订
项目周期
24个月
下达日期
2018-12-29
申报日期
2017-03-10
公示开始日期
2018-07-26
公示截止日期
2018-08-10
标准类别
方法
国际标准分类号
07.080
07 数学、自然科学
07.080 生物学、植物学、动物学
归口单位
全国生化检测标准化技术委员会
执行单位
全国生化检测标准化技术委员会
主管部门
国家标准化管理委员会

起草单位

目的意义

意义:肌动蛋白(Actin)是细胞骨架的主要成分,广泛表达于真核细胞。

目前发现Actin至少存在6种异构体形式,主要分布在心肌、骨骼横纹肌和平滑肌组织中,调控细胞的收缩能力,也表达于非肌肉细胞,调节细胞结构和活力。

肌动蛋白(Actin)分子量为43 kDA,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,因此它常被用于校正系统的内参。

而检测肌动蛋白最常用的方法就是使用针对肌动蛋白的抗体进行免疫印迹法检测。

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是免疫印迹法。

因为免疫印迹法操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。

要用免疫印迹法比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础。

所以需要一种校正系统上样量的内参抗体,与目的蛋白的抗体一起检测样品,以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。

肌动蛋白的抗体就是目前免疫印迹法检测中最常用的内参抗体,被广泛的应用。

正是因为肌动蛋白抗体的重要性,所以有必要规范市场上各种肌动蛋白抗体质量,为科研人员、检验检测人员提供更加稳定可靠的抗体产品,我们急需建立肌动蛋白抗体的免疫印迹法测定方法,建立统一的标准,为促进生命科学发展提供保障。

目的:建议肌动蛋白抗体的免疫印迹检测方法。

目前没有针对肌动蛋白抗体的免疫印迹法检测标准。

免疫印迹法的检测结果与样品上样量、样品物种来源以及抗体的使用稀释比都有直接的关系。

但是并没有直接的标准可依。

肌动蛋白抗体作为内参抗体使用应具有一定的普适性和广泛性,同类抗体的产品应具有一致的质量标准,便于规范肌动蛋白抗体的质量监管。

范围和主要技术内容

本标准规定了肌动蛋白抗体的免疫印迹检测的表观分子量、效价、物种反应及稳定性,建立了肌动蛋白抗体的免疫印迹法测定标准方法。本标准适用于肌动蛋白抗体的免疫印迹法测定,适用于肌动蛋白抗体的生产、监督与检测。 主要技术内容包括: 1.免疫印迹法的标准操作流程 2.肌动蛋白抗体测定目的蛋白的表观分子量大小 3.肌动蛋白抗体的效价范围 4.肌动蛋白抗体所应检测的物种范围 5.肌动蛋白抗体的稳定性检测方法

国家级科研专项支撑

2015年度国家科技支撑计划《科研用试剂产业链创新体系的构建》(编号2015BAK45B00)任务内容。